特点及优势

• 特异性

  差异化的PyroHotstart技术可以使非特异性扩增产物的生成最少化，PCR反应效率最大化，从而有效扩增少量模板DNA

• 灵敏性

  出色的灵敏度和扩增效率亦可检测痕量样品

• 稳定性

  添加了稳定剂可以在常温下运输，比溶液型产品更稳定 stabilizing agents

• 便利性
  

  使用PyroHotstart技术缩短了PCR条件的优化时间，任何人都可以从复杂DNA模板中轻松获取目的基因

• 重现性

  ISO 9001质量体系下的批量生产可最大程度地减少批次之间的差异，即使在重复实验中也可得到可重复的实验结果

概述

(a)在Zero cycle抑制PCR反应
制备PCR混合液后，使用PPi防止在达到预变性温度之前形成非特异性反应物 为了使DNA聚合酶具有活性，需要镁离子，因为添加到混合液中的PPi与镁离子具有高亲和力，可以通过保留镁离子来抑制PCR反应

(b) 变性(Denaturation)
在变性步骤中，当反应温度升高时，添加到混合液中的PPase会被激活，从而将PPi分解为Pi从而解离镁离子 解离的镁离子与DNA聚合酶结合并激活该酶催化PCR反应

(c)退火(Annealing) & 延伸(Extension)
随着PCR循环的进行，活化的DNA聚合酶会扩增目标DNA

应用

• High specificity PCR

• High sensitivity PCR

• gDNA template PCR

• Low - copy target PCR

• Multiple primer pair PCR

• cDNA template PCR

实验数据

Figure. Specificity comparison between AccuPower® PCR PreMix and AccuPower® HotStart PCR PreMix

Lane 1: P75/P73 primer set (139 bp)
Lane 2: P55/P53 primer set (211 bp)
Lane 3: P55/P63 primer set (447 bp)
Lane 4: P75/P83 primer set (618 bp)
Lane 5: P55/P73 primer set (1082 bp)
Lane 6: P65/P83 primer set (1296 bp)
Lane 7: P55/P83 primer set (1561 bp)